Título

Relação entre anticorpos contra o doador definidos pelo teste Luminex-Single Antigen e o resultado de provas cruzadas por CDC e citometria de fluxo

Introdução

O objetivo deste estudo foi investigar a relação entre MFI de anticorpos contra o doador (DSA) definidos pelo teste Luminex-Single Antigen (LSA) e o resultado de provas cruzadas por citotoxicidade dependente de complemento (XM-CDC) e por citometria de fluxo (XM-CF).

Material e Método

Analisamos 470 XM-CDC contra linfócitos T e B de doadores falecidos, tipificados para HLA-A,B,C,DR,DQ e 275 XM-CF contra linfócitos T de doadores vivos tipificados para HLA-A,B. O teste LSA (One Lambda) foi realizado em soros que apresentaram positividade no teste de screening (Luminex-Mixed, One Lambda). No caso de mais de um DSA, foi considerado somente o de maior MFI.

Resultados

Reações positivas no XM-CDC: não ocorreram com nenhum de 217 soros negativos (NEG) no teste de screening ou com DSA no LSA com MFI <1500; ocorreram em 5% de 65 soros com DSA com MFI ≥1500 <5000; em 27% de 37 soros com DSA com MFI ≥5000 <10000 e em 78% de 151 soros com DSA com MFI ≥10000. Valor de corte de MFI de 11.760 (ROC) associou-se com valor preditivo positivo (VPP) de 86,6% e valor preditivo negativo (VPN) de 95,5%. Reações positivas no XM T-CF: não ocorreram com nenhum de 206 soros NEG no teste Mixed (n=154) ou com DSA no LSA com MFI ≤ 300 (n=52); ocorreram em 20% de 20 soros com DSA com MFI >300 e <1500; em 73% de 11 soros com DSA com MFI ≥1500 <3000 e em 100% de 38 soros com DSA com MFI ≥ 3000. Valor de corte de MFI de 1500 associou-se com VPP de 93,9% e VPN de 98,2%. A correlação entre valores de MFI e de mean channel shift (MCS) foi 0,93.

Discussão e Conclusões

Creditamos a excelente relação observada entre MFI e resultado de provas cruzadas à maneira de execução do teste visando à eliminação de reações falso-negativas (pré-aquecimento do soro) e falso-positivas (pré-teste no Luminex-Mixed e análise crítica do LSA).

Palavras Chave

MFI, CDC, CF, correlação MFI-MCS