Título

MICRORNAS COMO POTENCIAIS BIOMARCADORES PRECOCES DE LESAO RENAL AGUDA INDUZIDA POR LIPOPOLISSACARIDEO EM MODELO EXPERIMENTAL DE SEPSE

Introdução

A lesão renal aguda (LRA) consiste na redução abrupta da taxa de filtração glomerular evidenciado pelo aumento de creatinina sérica e/ou redução do débito urinário, comprometendo o equilíbrio hidroeletrolítico e a depuração de escórias nitrogenadas. A causa é multifatorial, contribuindo a sepse para a alta prevalência. Sabe–se que o desenvolvimento e o atraso na identificação da LRA constituem fator de risco para cronicidade. Dessa forma, sua detecção precoce é imprescindível para a tomada de medidas em momento mais oportuno. Uma vez que, a creatinina sérica não constitui marcador de disfunção renal ideal, pois sua alteração é detectada tardiamente nas afecções, os microRNAs (miRs), classe de RNAs não codificantes, responsáveis pela regulação gênica, podem constituir ferramentas promissoras para uma abordagem mais precoce da LRA. Esta classe de moléculas pode ser encontrada em fluidos biológicos, no interior de vesículas, tais como, exossomos e microvesículas.
O objetivo deste trabalho foi avaliar os potenciais miRs que poderiam ser utilizados como biomarcadores precoces na LRA induzida por sepse.

Material e Método

Foram utilizados ratos machos Wistar com 12 semanas, submetidos a administração de lipopolissacarídeos (LPS), via intraperitoneal, na dose de 7,5 mg/kg. A função renal foi inicialmente avaliada pela creatinina sérica, com alteração detectada 4h após a administração da droga. Afim de avaliar se os miRs poderiam atuar como biomarcadores precoces, a coleta de amostras de sangue ocorreu antes e 2h após a administração de LPS, e, portanto, antes da elevação da creatinina. Exossomos presentes no soro foram isolados e os miRs totais extraídos para avaliação do perfil gênico pela técnica de PCR array.

Resultados

Desta análise, apenas o miR -181a–5p e o miR-23b–3p, apresentaram expressão elevada no animal com LRA quando comparados com o grupo controle (P< 0,05). O estudo por bioinformática demonstrou que o miR-23b–3p possui como alvos, moléculas associadas a carcinogênese e fibrose. Já a família do miR-181 está relacionado com a inibição de citocinas pró- inflamatórias sintetizadas a partir da ativação de toll like receptors tipo 4 (TLR 4), por meio da repressão de moléculas da via do NF kappa B.

Discussão e Conclusões

Considerando- se que o LPS ativa fatores de transcrição através da ligação com TLR 4, levando a produção de citocinas pró- inflamatórias, possíveis alterações prévias nos níveis séricos do miR-181a–5p poderão definir precocemente a LRA induzida por sepse.

Palavras Chave

Sepse, Lesão Renal Aguda, microRNAs, Lipopolissacarídeos, Toll Like Receptors, exossomos