TÍTULO

CLASSIFICAÇAO DOS SUBTIPOS MOLECULARES DO CANCER GASTRICO POR MEIO DE TECNICAS DE EXPRESSAO GENICA E PROTEICA

OBJETIVO

Recentemente, a classificação molecular do câncer gástrico (CG) proposta pela TCGA emergiu como opção promissora para definir subtipos prognósticos, distinguir o comportamento biológico, além de permitir a identificação de potenciais alvos terapêuticos para drogas específicas. Através de técnicas moleculares o CG foi dividido em 4 subtipos: instabilidade de microssatélites (MSI), vírus Epstein-Barr (EBV)-positivo, genomicamente estável (GS) e instabilidade cromossômica (CIN). Posteriormente, variações da classificação molecular (Asiática e Cluster) foram descritas numa tentativa de aumentar sua acurácia. Entretanto, os custos associados à complexidade técnica das metodologias moleculares são ainda um obstáculo para sua adoção na prática de rotina. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi determinar os subtipos moleculares de CG empregando técnicas de imuno-histoquímica (IH) e hibridização in situ (ISH) e propor um novo fluxo de classificação que melhor determine o prognóstico em pacientes com CG.

MÉTODO

Avaliaram-se retrospectivamente 287 pacientes com CG submetidos à gastrectomia-D2 curativa através da construção de blocos de tissue microarray (TMA) com 3 amostras de tumor por caso, totalizando 861 spots tumorais. A expressão das proteínas de reparo do DNA, E-caderina e p53 foram avaliadas por IH. A infecção pelo EBV foi detectada por ISH.

RESULTADOS

Após avaliação microscópica, foi encontrada a seguinte frequência para os perfis avaliados: MSI (20,9%), p53 (36,6%), E-caderina (9,1%) e EBV (10,5%). Os demais casos foram classificados como expressão não alterada (NA) (31%). Uma vez que alguns pacientes apresentam mais de um perfil, determinou-se um fluxograma de classificação utilizando o método de regressão de Cox para sobrevida livre de doença (SLD). A partir do modelo, a hierarquia da classificação estabelecida foi: E-caderina, MSI, p53 e, por último, EBV. Sendo esta classificação denominada como “Classificação de Risco”. Os grupos apresentaram associação com características distintas, semelhante aos subtipos moleculares, tais como: gênero masculino (EBV; p=0,043); idade avançada (MSI; p=0,004), presença de comorbidades (MSI; p=0,006), gastrectomia total (EBV; p=0,001), localização distal (MSI; p=0,004), tipo difuso de Laurén (E-caderina; p<0,001) e estádio avançado (E-caderina; p=0,029).
A SLD (p=0,002) e sobrevida global (SG) (p=0,038) foram distintas entres os subtipos. Os CGs MSI e EBV tiveram melhor SLD que os demais subtipos. Na análise multivariada, o tipo de gastrectomia, pT, pN e subtipos de acordo com a Classificação de Risco foram fatores independentes associados à SLD. A Classificação de Risco mostrou acurácia semelhante às demais classificações (TCGA, Asiática, Cluster) na determinação da SLD e SG.

CONCLUSÕES

O emprego das técnicas de IH/ISH foi capaz de determinar os subtipos de CG, semelhantes à classificação molecular. Este método de classificação simples representa uma opção viável para uso na prática clínica.